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細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。貼壁細(xì)胞的消化法傳代:吸除瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。以50ml培養(yǎng)瓶為例,向瓶內(nèi)加入2-3ml胰蛋白酶,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶,使消化液流遍所有細(xì)胞表面。消化在37C或室溫25C以上環(huán)境下進(jìn)行。消化后把培養(yǎng)瓶放置顯微鏡下進(jìn)行觀察.發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后。應(yīng)立即終止消比,然后吸掉消化液后再加全培養(yǎng)液終止消化。用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞,吹打過程要順序進(jìn)行,從...
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不管任何的產(chǎn)品,在決定購買前,你必須了解它的屬性以及事項(xiàng)。那我們?cè)谶x用細(xì)胞株的時(shí)候,有什么值得注意呢?細(xì)胞株的生物等級(jí),由于有些細(xì)胞株及菌株屬于管制品,所以從國外購貨比較麻煩。在購買國外細(xì)胞株時(shí),需交待國外加比較多的干冰(一般在13公斤以上,采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。報(bào)關(guān)時(shí)盡量提供比較充足的證明材料,以免擔(dān)擱時(shí)間而導(dǎo)致干冰揮發(fā)完細(xì)胞株死亡,甚至于被退回給發(fā)貨人。還有在決定購買細(xì)胞株之前,必須仔細(xì)閱讀他們的培養(yǎng)信息。
3-18
酶標(biāo)儀的基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同。酶標(biāo)儀的光度測定試驗(yàn)應(yīng)在特定的儀器中進(jìn)行,溫度一般為37℃±1℃。供試品和鱟試劑的加樣量、供試品和鱟試劑的比例以及保溫時(shí)間等,參照所用儀器和試劑的有關(guān)說明進(jìn)行。為保證濁度和顯色試驗(yàn)的有效性,應(yīng)預(yù)先進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的可靠性試驗(yàn)以及供試品溶液的干擾試驗(yàn)。而且標(biāo)準(zhǔn)曲線的可靠性試驗(yàn),當(dāng)使用新批號(hào)的鱟試劑或試驗(yàn)條件發(fā)生了任何可能會(huì)影響檢驗(yàn)結(jié)果的改變時(shí),需進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的可靠性試驗(yàn)。它的光度測定試驗(yàn)就是這樣的。
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酶標(biāo)儀有濁度法和顯色基質(zhì)法兩種,讓我們來認(rèn)識(shí)下什么是顯色基質(zhì)法。顯色基質(zhì)法系利用試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中產(chǎn)生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團(tuán)的多少而測定內(nèi)毒素含量的方法。根據(jù)檢測原理,分為終點(diǎn)顯色法和動(dòng)態(tài)顯色法。終點(diǎn)顯色法是依據(jù)反應(yīng)混合物中內(nèi)毒素濃度和其在孵育終止時(shí)釋放出的有色團(tuán)的量之間存在著量化關(guān)系來測定內(nèi)毒素含量的方法。動(dòng)態(tài)顯色法是檢測反應(yīng)混合物的色度到達(dá)某一預(yù)先設(shè)定的吸光度所需要的反應(yīng)時(shí)間,或是檢測色度增長速度的方法。
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酶標(biāo)儀要怎么樣去測試呢?它使用光度測定法,其中又分為濁度法和顯色基質(zhì)法。濁度法系利用檢測鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程過程中的濁度變化而測定內(nèi)毒素含量的方法。根據(jù)檢測原理,可分為終點(diǎn)濁度法和動(dòng)態(tài)濁度法。終點(diǎn)濁度法是依據(jù)反映混合物中的內(nèi)毒素濃度和其在孵育終止時(shí)的濁度(吸光度和透光率)之間存在著量化關(guān)系來測定內(nèi)毒素含量的方法。動(dòng)態(tài)濁度法是檢測反應(yīng)混合物的濁度到達(dá)某一預(yù)先設(shè)定的吸光度所需要的反應(yīng)時(shí)間,或是檢測濁度增加速度的方法。
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我們以前學(xué)過生物學(xué),會(huì)說到細(xì)胞株、細(xì)胞系,那他們有什么區(qū)別呢?細(xì)胞株被定義為經(jīng)原代培養(yǎng)的組織細(xì)胞,培養(yǎng)到第10代左右,度過*次死亡危機(jī)后的細(xì)胞群,這種細(xì)胞的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變;細(xì)胞系則被定義為可以度過第二次死亡危機(jī),傳代培養(yǎng)到40~50代的細(xì)胞,這部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了部分改變并且細(xì)胞帶有癌變的特點(diǎn),這種細(xì)胞在適宜條件下無限傳代。細(xì)胞株用于檢測細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10%小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)細(xì)胞因子依賴細(xì)胞株還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃5%CO2的飽和...
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PCR儀基本上它是利用DNA聚合酶進(jìn)行專一性的連鎖復(fù)制。它具備開放性平臺(tái),儀器滿足所有定量PCR試劑的要求,具有實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的全部功能。除此之外,還包括對(duì)儀器溫控和光學(xué)系統(tǒng)要求更高的分析和等位基因識(shí)別功能。實(shí)驗(yàn)室中只要具備了一臺(tái)這種設(shè)備,無論是完成實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)還是HRM分析功能,都能得到高質(zhì)量數(shù)據(jù)。儀器采用*的加熱控溫系統(tǒng)和創(chuàng)新性的靈敏光學(xué)檢測系統(tǒng),為得到高度、高重復(fù)性、高分辨率的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)提供可靠保障。這就是性、創(chuàng)新性。
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